详细介绍
在分子生物学与病原微生物研究领域,真菌的分子鉴定、基因功能分析及种群多样性研究,均以高质量基因组DNA的获取为起点。然而,与动植物样本不同,真菌细胞拥有一层坚韧的细胞壁,其复杂结构(主要由几丁质、葡聚糖和甘露糖蛋白等组成)构成了核酸释放的天然屏障。传统提取方法不仅操作繁琐、耗时长,且往往难以完全破壁,导致DNA得率低、纯度差,严重影响下游实验结果。
真菌DNA提取纯化试剂盒(磁珠法) 正是针对这一核心难题而研发的专项解决方案。它针对真菌细胞壁的坚韧特性优化了破壁流程,依托超顺磁性磁珠对核酸的高亲和力,实现了真菌基因组DNA的高效释放与特异性富集。试剂盒能够高效去除蛋白质、多糖等PCR抑制物,获得高纯度、高完整性的基因组DNA,为PCR扩增、基因克隆、测序及病原微生物鉴定等下游实验提供优质可靠的反应模板。
本试剂盒是一套专门用于从真菌样本(如酵母、霉菌、大型真菌子实体等)中快速提取纯化基因组DNA的磁珠法试剂盒。它整合了高效破壁、磁珠富集、杂质去除三大核心功能,提供从样本裂解到DNA洗脱的全流程解决方案。试剂盒包含裂解液、蛋白酶K、结合液、洗涤液、洗脱液及磁珠等全部必需组分。操作过程无需使用有毒的酚、氯仿等有机溶剂,也无需耗时的醇类沉淀步骤,整个提取过程安全、便捷。
本试剂盒采用化学法与机械法相结合的裂解策略,确保对坚韧真菌细胞壁的彻底破碎:
细胞裂解后,释放出的基因组DNA在高盐缓冲液条件下,通过氢键和静电作用被特异性吸附到超顺磁性硅基磁珠表面。借助磁性分离器,结合了DNA的磁珠与溶液中的蛋白质、多糖及其他杂质快速分离。经过多次洗涤去除残留杂质后,最后在低盐洗脱液或Nuclease-free ddH₂O的作用下,高纯度DNA从磁珠上释放出来,即可获得可直接用于下游实验的优质基因组DNA。
高纯度、高得率,无抑制剂残留:针对真菌样本优化的裂解体系与高亲和力磁珠,能够高效去除蛋白质、多糖、腐殖酸等PCR抑制物。所得DNA产物OD₂₆₀/₂₈₀比值在1.7-1.9之间,纯度优异,可直接用于对模板质量要求较高的下游实验。
高效破壁,节省时间:利用特异性研磨珠与优化的裂解液协同作用,无需溶菌酶长时间孵育,即可在短时间内获得高质量的DNA。手工操作时间极少,显著提升实验效率。
操作安全,绿色环保:提取全过程不涉及酚、氯仿、β-巯基乙醇等有毒有机溶剂,无需在通风橱中操作,对实验人员健康友好,也降低了废液处理成本。
适配灵活,兼容手动与自动化:试剂盒既支持手工磁力架操作,也可完美适配磁珠法全自动核酸提取仪,支持32/48/96通量的高通量批量提取。
样本兼容性广:适用于从真菌菌丝体、孢子、酵母培养物、子实体等各类真菌样本中提取DNA。部分型号还可兼容细菌、放线菌及复杂生物制品基质。
样本裂解:取适量真菌样本(菌丝体/孢子/酵母)至含研磨珠的裂解管中,加入裂解液与蛋白酶K,使用破壁仪或涡旋振荡器进行充分破壁处理。
磁珠结合:向裂解产物中加入磁珠悬液与结合液,颠倒混匀,室温孵育使DNA与磁珠特异性结合。
洗涤去杂:将离心管置于磁力架上,待磁珠完全聚集后吸弃上清。加入洗涤液重悬磁珠,再次磁分离并吸弃上清,重复洗涤以去除蛋白质、盐离子等杂质。
洗脱收集:加入洗脱液或Nuclease-free ddH₂O重悬磁珠,56℃温浴片刻使DNA充分溶解。磁分离后小心吸取上清,即获得纯化基因组DNA。
基因克隆与载体构建:为目的基因的扩增与克隆提供高保真模板。
分子标记与种群遗传学:用于RAPD、AFLP、SSR等分子标记分析。
本试剂盒在生产过程中严格遵循质量管理体系要求。产品设计及生产参照国家医药行业标准YY/T 1717-2020《核酸提取试剂盒(磁珠法)》 执行,每批次产品均经过严格的质量检测,确保批次间性能稳定、结果可靠。部分型号已参照中国药典qPCR方法检测相关要求进行验证,可满足生物制品质量控制等高端应用场景的需求。
储存条件:不同组分储存条件有所差异。通常PartⅠ(裂解液等) 建议2-8℃保存;PartⅡ(磁珠等) 建议室温避光保存。具体请以产品说明书为准,有效期一般为18-24个月。
操作提示:对于痰液等粘稠样本,建议先进行液化处理后再进行提取。破壁过程中注意防止样本交叉污染,建议使用带滤芯枪头及无菌离心管。
真菌DNA提取纯化试剂盒(磁珠法)以针对真菌细胞壁的优化破壁技术、磁珠特异性富集的高纯度保障、手动与自动化双模式灵活适配三大核心优势,为真菌分子生物学研究提供了高效、可靠、安全的核酸制备解决方案。选择本试剂盒,即意味着从样本处理的第一步起,就为PCR、测序等下游实验奠定了坚实可靠的基础。
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