详细介绍
在分子生物学、合成生物学及工业微生物研究领域,酵母菌(Saccharomyces cerevisiae等)作为最经典的模式生物之一,广泛应用于基因功能研究、代谢工程改造及重组蛋白表达等场景。高质量基因组DNA的获取,是酵母分子鉴定、基因克隆、 Southern杂交及全基因组测序等下游实验的必备前提。然而,与普通细菌不同,酵母细胞拥有一层坚韧的多糖-蛋白质复合细胞壁,传统提取方法往往需要冗长的酶解破壁或繁琐的玻璃珠研磨操作,不仅耗时耗力,还容易导致DNA剪切降解。
酵母菌基因组提取纯化试剂盒(磁珠法) 正是针对这一核心难题而研发的专项解决方案。它整合了高效破壁、磁珠特异性富集与多糖/蛋白质高效去除三大核心功能,依托超顺磁性纳米磁珠对核酸的高亲和力,实现酵母基因组DNA的快速释放与高纯度纯化。操作全程无需酚、氯仿等有毒有机溶剂,也无需耗时的醇类沉淀步骤,样品裂解后仅需约15分钟即可完成纯化,为PCR扩增、基因克隆、测序等下游分子实验提供高纯度、高完整性的优质模板。
本试剂盒是一套专门用于从酵母培养物(如Saccharomyces cerevisiae、Candida albicans等)中快速提取纯化基因组DNA的磁珠法试剂盒。试剂盒包含裂解液、蛋白酶K、结合液、洗涤液、洗脱液及超顺磁性纳米磁珠等全部必需组分。产品基于高结合力的纳米磁性粒子纯化方式,在特定条件下使基因组DNA与磁珠特异性结合,通过外界磁场实现快速分离,再经洗涤去除蛋白质、多糖等杂质,最后用低盐缓冲液将高纯度DNA从磁珠上洗脱下来。
本产品可适配手工磁力架操作与全自动核酸提取仪两种工作模式,灵活满足不同通量与场景的提取需求。
1. 高效破壁——针对酵母细胞壁的优化裂解
酵母细胞壁的坚韧结构是核酸释放的主要屏障。本试剂盒采用化学裂解与酶消化协同作用的破壁策略:在蛋白酶K与优化裂解液的共同作用下,酵母细胞壁的多糖-蛋白质网状结构被有效破坏,基因组DNA从胞内充分释放出来。部分型号配备特异性研磨珠,通过物理研磨与化学裂解的协同作用,无需溶菌酶长时间孵育即可在短时间内获得高质量的DNA。
2. 磁珠特异性吸附——高纯度核酸富集
释放出的基因组DNA在特定高盐条件下,通过氢键和静电作用被特异性吸附到超顺磁性纳米磁珠表面。磁珠表面经特殊化学修饰,对核酸具有超高亲和力,而对蛋白质、多糖等杂质几乎不吸附。借助外界磁场(如磁分离架),结合了DNA的磁珠可在数秒内与溶液中的其他成分快速分离。
3. 高效去杂——彻底去除PCR抑制物
酵母细胞中富含的多糖、多酚等物质极易与DNA共沉淀,形成粘稠胶状物,严重影响DNA的溶解性和下游酶促反应效率。本试剂盒通过优化的洗涤缓冲液体系,经两次充分洗涤即可高效去除蛋白质、多糖、无机盐离子等PCR抑制物,确保所得DNA产物的高纯度。
高纯度、高完整性
通过本试剂盒纯化得到的基因组DNA长度最长可达50kb左右,平均为30kb左右,最短为100bp的DNA片段也可被有效纯化。所得DNA产物的OD₂₆₀/₂₈₀比值通常在1.6至1.9之间,纯度优异,可直接用于对模板质量要求较高的下游实验。电泳检测显示条带明亮清晰,无RNA残留。
高效便捷,快速出结果
本试剂盒采用优化的裂解与结合体系,无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀。样品裂解后仅需约15分钟即可完成整个纯化流程。手工操作时间极少,单次可处理0.5~1.5mL酵母培养液,一次可处理多达5000万个酵母细胞。
操作安全,绿色环保
提取全过程不涉及酚、氯仿、β-巯基乙醇等有毒有机溶剂,无需在通风橱中操作,对实验人员健康友好,也降低了废液处理成本。
适配灵活,兼容手动与自动化
本试剂盒既支持手工磁力架操作,也可完美适配磁珠法全自动核酸提取仪,支持高通量批量提取。提取得到的DNA可直接用于酶切、PCR、测序、Southern杂交等各类下游实验。
样本裂解:取适量酵母培养物(推荐0.5~1.5mL对数生长期菌液),离心收集菌体后加入裂解液与蛋白酶K,充分混匀并进行裂解处理。
洗涤去杂:将离心管置于磁力架上,待磁珠完全聚集后吸弃上清。加入洗涤液重悬磁珠,再次磁分离并吸弃上清,重复洗涤以去除蛋白质、多糖及盐离子等杂质。
本试剂盒提取的高质量酵母基因组DNA可广泛应用于以下实验场景:
基因克隆与载体构建:为目的基因的扩增与克隆提供高保真模板
酶切分析与Southern杂交:验证基因整合与基因组结构
全基因组测序与文库构建:为NGS文库构建提供高质量起始材料
本试剂盒在生产过程中严格遵循质量管理体系要求,每批次产品均经过严格的质量检测,确保批次间性能稳定。不同组分的储存条件有所差异:PartⅠ(裂解液等)建议2~8℃保存;PartⅡ(磁珠等)建议室温避光保存,有效期一般为18个月。具体请以产品说明书为准。
酵母菌基因组提取纯化试剂盒(磁珠法)以针对酵母细胞壁的优化破壁技术、磁珠特异性富集的高纯度保障、手动与自动化双模式灵活适配三大核心优势,为酵母分子生物学研究提供了高效、可靠、安全的核酸制备解决方案。选择本试剂盒,即意味着从样本处理的第一步起,就为PCR、测序等下游实验奠定了坚实可靠的基础。
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