详细介绍
在分子生物学与基因工程研究中,琼脂糖凝胶电泳是DNA与RNA片段分离、鉴定及纯化最基础、最常用的技术手段。而电泳结果的清晰度与可靠性,在很大程度上取决于电泳缓冲液的品质。TAE电泳缓冲液(Tris-Acetate-EDTA Buffer) 正是为此而设计的经典核酸电泳专用缓冲液。它由Tris(三羟甲基氨基甲烷)、乙酸(Acetic Acid)及EDTA(乙二胺四乙酸) 按优化配比精确配制而成,缓冲能力稳定、离子强度适中,可有效维持电泳过程中的pH平衡、抑制核酸降解。本产品为50倍浓缩液(50×),使用时简单稀释即可获得高品质的1×工作液,广泛适用于DNA与RNA的琼脂糖凝胶电泳分离与鉴定,是分子生物学实验室核酸电泳的必备基础试剂。
本产品严格遵循经典TAE配方体系,每一升50×浓缩液的主要成分为2M Tris-乙酸(Tris-acetate)与50mM EDTA。用蒸馏水或去离子水稀释50倍后,即可获得标准的1×TAE工作液,其组成为40mM Tris-乙酸、1mM EDTA,pH值稳定在8.0-8.3(25℃)。
各组分在电泳体系中各司其职、协同作用:
Tris-乙酸(Tris-Acetate) :作为缓冲体系的核心,Tris-乙酸通过其酸碱缓冲对维持电泳过程中凝胶体系的pH稳定。稳定的pH环境确保核酸分子在电场中保持恒定的电荷密度与迁移率,是从加样孔至凝胶底部的迁移距离高度一致、条带位置准确可重复的基础保障。
EDTA(乙二胺四乙酸) :作为金属离子螯合剂,EDTA可有效螯合体系中的二价金属离子(如Mg²⁺、Ca²⁺等)。这一作用可抑制金属离子依赖性核酸酶(DNase)的活性,保护DNA/RNA样品在电泳过程中不被降解。同时,EDTA的加入也有助于维持核酸分子的天然构象,确保迁移行为的均一性。
电泳过程中,正负极不断发生电解反应,产生H⁺与OH⁻,若缓冲液缓冲能力不足,凝胶体系的pH将逐渐偏离最适范围,导致核酸迁移速率改变、条带扭曲甚至DNA变性。TAE缓冲液凭借其稳定且适中的缓冲能力,能够在常规电泳时长内(通常30-60分钟)有效抵御pH漂移。与缓冲能力过强的TBE相比,TAE的离子强度更为温和,不易造成凝胶发热或高电渗作用,尤其适合常规分析与片段回收场景。对于需要长时间电泳或超高分辨率分离小片段的实验,TBE可能是更优选择;而在绝大多数日常核酸分析工作中,TAE凭借其均衡的性能表现,已成为使用最为广泛的缓冲系统。
电泳缓冲液中的离子强度直接影响核酸分子的迁移速度与凝胶的发热程度。TAE缓冲液具有适中的离子强度,能够在保障溶液具备足够导电性的同时,避免因电流过大导致凝胶过热甚至融化。双链线状DNA在TAE中的迁移率较其他缓冲液快约10%,有助于在较短时间内完成电泳分离,尤其适合对大于13kb的大片段DNA进行电泳分析。这一特性使TAE在基因组DNA分析、大分子超螺旋DNA分离及大于1500bp的DNA和RNA电泳等场景中表现尤为出色。
TAE缓冲液为核酸分子提供了稳定、均一的电泳环境。在1×TAE工作液中,核酸片段在电场作用下沿凝胶孔径按分子大小有序迁移。得益于TAE稳定的pH环境与适中的离子强度,电泳条带通常呈现边界清晰、边缘锐利、无拖尾或弥散的理想形态。乙酸成分的存在降低了凝胶的微环境pH值,有助于提高电泳速度并改善条带的聚焦效果。同时,批次间稳定的配方与优异的缓冲性能,确保了不同时间、不同操作者获得的电泳图谱具有高度的可重复性。
本产品适配多种核酸电泳相关实验场景:
DNA琼脂糖凝胶电泳:用于PCR产物鉴定、质粒DNA酶切分析、基因组DNA质量检测。
RNA非变性琼脂糖凝胶电泳:用于总RNA或特定RNA的质量评估。
DNA片段回收:TAE体系不含硼酸,不会与琼脂糖生成非共价复合物干扰回收效率,是切胶回收DNA片段的推荐缓冲系统。
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) :适用于部分核酸的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。
凝胶制备:可直接使用TAE缓冲液配制琼脂糖凝胶。
本产品为50×浓缩液形式,既保证了储存的稳定性,也方便实验人员根据实际用量灵活配制。稀释50倍即可获得1×TAE工作液。这一设计大幅降低了单位实验的缓冲液成本与储存空间占用,尤其适合电泳频率较高的实验室。产品经0.22μm滤膜过滤除菌,无DNase/RNase污染,可直接用于对核酸完整性要求较高的敏感实验。
TAE电泳缓冲液(50×)以经典的科学配方、稳定的缓冲性能、适中的离子强度与便捷的浓缩液形式,为核酸琼脂糖凝胶电泳提供了可靠、高效的分离体系。它让DNA与RNA的分离鉴定变得条带清晰、结果可靠、操作简便,是每一位分子生物学研究者值得信赖的基础试剂。
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