酵母基因组提取纯化试剂盒柱式法 科研试剂 可免费开发票 FWKNE

柱式法酵母菌基因组提取纯化试剂盒：为酵母分子研究提供高纯度基因组DNA制备方案

在分子生物学、合成生物学及工业微生物研究领域，酵母菌（如Saccharomyces cerevisiae、Pichia pastoris、Schizosaccharomyces pombe等）作为最经典的模式生物之一，广泛应用于基因功能研究、代谢工程改造及重组蛋白表达等场景。高质量基因组DNA的获取，是酵母分子鉴定、基因克隆、Southern杂交及全基因组测序等下游实验的必备前提。然而，与普通细菌不同，酵母细胞拥有一层坚韧的多糖-蛋白质复合细胞壁，传统提取方法往往需要冗长的酶解破壁或繁琐的液氮研磨，不仅耗时耗力，还容易导致DNA剪切降解和交叉污染。

柱式法酵母菌基因组提取纯化试剂盒正是针对这一系列核心难题而研发的专项解决方案。它利用硅胶柱特异性吸附技术，通过高效裂解酵母细胞壁与离心柱纯化相结合的方式，实现酵母基因组DNA的快速释放与高纯度分离。操作全程无需酚、氯仿等有毒有机溶剂，也无需耗时的醇类沉淀步骤，为PCR扩增、基因测序、基因克隆等下游分子生物学实验提供高纯度、高完整性的可靠样本支撑。

核心技术原理：三重机制保障高效纯化

本试剂盒的纯化原理基于破壁释放、选择性吸附、高效去杂三个核心步骤的协同作用：

1. 高效破壁——针对酵母细胞壁的优化裂解

酵母细胞壁的坚韧结构是核酸提取的主要障碍。本试剂盒采用溶壁酶（Lyticase）处理与蛋白酶K消化相结合的破壁策略。酵母细胞经溶壁酶处理去除细胞壁后，独特的结合液与蛋白酶K迅速裂解细胞，同时有效灭活内源性核酸酶，防止DNA在提取过程中被降解。这一裂解体系既适用于酿酒酵母，也适用于毕赤酵母、裂殖酵母等多种酵母材料。

2. 硅胶膜选择性吸附——高纯度核酸富集

在裂解完成后，基因组DNA在高离序盐状态（如盐酸胍或异硫氰酸胍）下，通过氢键和静电作用被选择性吸附于离心柱内的硅基质膜上。离心柱中采用的硅基质材料为特制新型材料，能够高效、专一吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。吸附过程具有高度的选择性——DNA被高效结合，而蛋白质、多糖及其他细胞代谢物等杂质则不被吸附，直接随滤液被去除。

3. 高效去杂——彻底去除PCR抑制物

吸附后的硅胶膜经过抑制物去除液和漂洗液的快速漂洗-离心步骤，将残留的细胞代谢物、蛋白质、无机盐离子等PCR抑制物彻底清除。最后，使用低盐洗脱缓冲液将纯净的基因组DNA从硅基质膜上洗脱下来，即可获得可直接用于下游实验的高质量DNA。

操作流程：简单快速，步骤清晰

本试剂盒采用经典的离心柱法操作流程，步骤清晰、操作简便：

1. 样本收集：取1-3 mL处于指数生长期的酵母培养液（一般OD₆₀₀值为1.0时，约含1-2×10⁷ cells/mL），12,000 rpm离心1分钟，尽量吸除上清。

2. 破壁处理：加入山梨醇缓冲液重悬菌体，加入溶壁酶溶液，30℃水浴处理30分钟。

3. 细胞裂解：离心收集沉淀后，加入结合液与蛋白酶K，充分混匀后进行裂解处理，使酵母细胞完全裂解，基因组DNA释放至溶液中。

4. 柱结合：将裂解产物转移至离心柱中，通过高速离心使DNA在穿过硅胶膜的瞬间被选择性吸附。

5. 洗涤去杂：加入抑制物去除液和漂洗液，经离心将蛋白质、多糖等杂质彻底去除。

6. 洗脱收集：加入洗脱缓冲液，离心收集滤液，即获得纯化基因组DNA。

全流程约1小时内即可完成单个样品的提取，大幅缩短了实验准备时间。

核心优势：高纯度、高效率、高适配

高纯度、高完整性

通过本试剂盒纯化得到的基因组DNA纯度优异，OD₂₆₀/₂₈₀比值一般在1.7至1.9之间。从约3 mL处于指数生长期的酵母培养液中，一般一次抽提可纯化出10-15 μg的高质量基因组DNA。提取的基因组DNA片段大，可直接用于酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

操作安全，绿色环保

提取全过程无需使用苯酚、氯仿等有毒试剂，也无需乙醇沉淀等步骤，无需在通风橱中操作，对实验人员健康友好，也降低了废液处理成本。

高效便捷，即取即用

采用柱式操作，比经典的沉淀法更简单、重复性更好。单个样品裂解后操作一般可在30分钟内完成。纯化得到的DNA可直接用于PCR、酶切、测序等下游实验，无需再纯化。

样本兼容性广

适用于多种来源的酵母培养物，包括酿酒酵母、毕赤酵母、裂殖酵母等常见酵母菌株。

典型应用场景

本试剂盒提取的高质量酵母基因组DNA可广泛应用于以下实验场景：

• PCR与qPCR：用于酵母特异性基因扩增、转化子鉴定及种属鉴定

• 基因测序：适用于一代测序及二代测序（NGS）文库构建

• 基因克隆与载体构建：为目的基因的扩增与克隆提供高保真模板

• 酶切分析与Southern杂交：验证基因结构与基因组特征

• 文库构建：为基因组文库的构建提供高质量起始材料

质量控制与储存条件

本试剂盒在生产过程中严格遵循质量管理体系要求，每批次产品均经过严格的质量检测，确保批次间性能稳定、结果可靠。离心吸附柱内硅基质膜采用特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。

建议按照产品说明书规定的条件储存各组分：多数组分可在室温（15-25℃） 条件下保存，蛋白酶K与溶壁酶需在-20℃保存，有效期一般为12个月。若缓冲液中出现沉淀，可在37℃水浴中重新溶解后使用。

柱式法酵母菌基因组提取纯化试剂盒以硅胶膜特异性吸附技术为核心，以高效破壁与杂质去除为保障，以安全、快速、简便为特点，为酵母分子生物学研究提供了高效、可靠、安全的核酸制备解决方案。选择本试剂盒，即意味着从样本处理的第一步起，就为PCR、测序等下游实验奠定了坚实可靠的基础。

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