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详细介绍
科研实验教学专用蛋白酶K——高活性广谱丝氨酸蛋白酶,核酸提取与蛋白消化的理想之选
产品概述
蛋白酶K(Proteinase K)是一种来源于林伯氏白色念球菌(Tritirachium album Limber) 的高活性丝氨酸蛋白酶。作为一种非特异性蛋白内切酶,蛋白酶K能够高效切割脂肪族氨基酸、疏水性氨基酸和芳香族氨基酸羧基端连接的肽键和酯键,具有极其广泛的底物特异性。其分子量约为28.9-29.3 kDa,由约277个氨基酸残基组成。
凭借广谱高效的蛋白降解能力、优异的稳定性以及对多种变性剂的耐受性,蛋白酶K已成为分子生物学、细胞生物学及生物制药等领域中不可或缺的核心工具酶。
核心优势
一、广谱高效,蛋白水解能力出众
蛋白酶K是一种非特异性蛋白内切酶,能够高效降解多种天然和变性蛋白质。其对天然蛋白质的酶切降解非常有效,可在不破坏DNA完整性的前提下水解肽键,释放被困核酸。在核酸提取过程中,蛋白酶K能够快速消化细胞裂解释放的组蛋白、核酸结合蛋白及其他杂质蛋白,同时有效灭活内源性RNase和DNase,保护核酸免受降解。
二、耐受性强,在变性剂中活性更优
蛋白酶K最显著的特点之一是对多种化学变性剂具有优异的耐受性。该酶在SDS(1%)、尿素或EDTA存在时仍保持高活性。其有效pH范围极宽(pH 4.0-12.5),最佳pH范围为pH 7.5-8.0。最佳反应温度为65℃,在37-70℃范围内均具有良好活性。Ca²⁺可以保护蛋白酶K不会自我降解,增加其热稳定性。这一特性使其特别适合与SDS、EDTA等常用细胞裂解液成分联合使用,在核酸提取过程中可同步完成细胞裂解与蛋白消化。
三、高纯度、无核酸酶污染
本产品经过色谱纯化等多步精制工艺处理,不含DNase、不含RNase。经严格质检,无DNA污染。这一高纯度标准确保在去除杂质蛋白的同时,不会引入核酸酶污染,保障核酸模板的完整性和下游实验的可靠性。产品比活性≥30 U/mg蛋白,批次间表现均一,可提供可重复的实验结果。
四、多剂型可选,适配不同实验场景
本产品提供多种剂型与规格,灵活适配各类实验需求:
核心技术参数
| 项目 | 详情 |
|---|---|
| 产品名称 | 蛋白酶K(Proteinase K) |
| CAS号 | 39450-01-6 |
| 分子量 | 约28.9-29.3 kDa |
| 来源 | 林伯氏白色念球菌(重组表达) |
| 比活性 | ≥30 U/mg protein |
| 有效pH范围 | pH 4.0-12.5 |
| 最佳pH范围 | pH 7.5-8.0 |
| 最佳反应温度 | 65℃ |
| 推荐工作浓度 | 0.05-1 mg/mL |
| 产品形式 | 冻干粉 / 溶液 |
| 储存条件 | 2-8℃短期保存,-20℃长期保存 |
核心应用场景
一、核酸提取与纯化(核心应用)
蛋白酶K是基因组DNA和总RNA提取流程中不可或缺的关键试剂。其核心作用包括:
高效裂解细胞:高效降解细胞和组织中的结构蛋白,释放胞内核酸
灭活核酸酶:快速消化内源性RNase和DNase,保护核酸免受降解
二、PCR样本制备与病毒核酸检测
在PCR前处理中,蛋白酶K可简化样本处理步骤,提高效率。在病毒核酸检测中,蛋白酶K可裂解病毒外壳蛋白释放核酸,同时灭活病毒,提高检测安全性。在新冠病毒核酸检测中,蛋白酶K是病毒采样液的重要组分。
三、组织消化与细胞裂解
在动物组织、植物组织及微生物样本的前处理中,蛋白酶K可高效消化结缔组织、细胞壁及细胞膜结构。适用于石蜡包埋组织切片的处理,暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
四、蛋白质研究与生物制药
五、原位杂交与朊病毒研究
在原位杂交技术中,蛋白酶K用于杂交前标本的处理,消化包围靶DNA的蛋白质,提高检测敏感性。在朊病毒研究中,可用于消化朊病毒脑组织样本中的蛋白。
品质保障
经过色谱纯化等多步精制工艺,比活性≥30 U/mg protein
批次间性能高度一致,提供可重复的实验结果
重组表达工艺,批间差更小、供应更有保障
适用于分子生物学、细胞生物学及生物化学研究
使用与储存建议
推荐反应条件:50-55℃孵育15-60分钟(组织样本建议延长至过夜)
失活处理:95℃加热10分钟可使蛋白酶K完全失活
安全提示:本产品仅限实验室科研与教学用途,不可用于人体、临床诊断或食用
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