脱氧核糖核酸酶I /DNA酶/ DNase I 试剂200 U 去除DNA RNase Free

脱氧核糖核酸酶 I（DNase I）——高活性核酸内切酶，RNA样品制备与分子生物学研究的理想工具

产品概述

DNase I（Deoxyribonuclease I，脱氧核糖核酸酶I）是一种高度保守的核酸内切酶，能够以内切方式水解单链或双链DNA，生成含有5'-磷酸基团和3'-羟基末端的寡核苷酸。其活性严格依赖于钙离子（Ca²⁺），并可被镁离子（Mg²⁺）或锰离子（Mn²⁺）激活。本产品为RNase-free级别的高纯度DNase I，经严格质量控制确保不含RNase活性，特别适用于对RNA完整性要求极高的实验场景。

核心优势

一、RNase-free品质，保障RNA样本完整性

本产品经过严格纯化工艺处理，确保无RNase污染，是RNA相关实验的理想工具酶。在RNA提取和纯化过程中，可高效去除基因组DNA污染，同时不影响RNA的完整性和下游应用。每批次产品均经过RNase活性检测，确保不会对RNA样本造成降解。

二、高纯度，无核酸酶交叉污染

本产品经过色谱纯化等多步精制工艺处理，不含其它DNA内切酶和外切酶，无蛋白酶污染。这一高纯度标准确保在去除目标DNA的同时，不会引入其他核酸酶污染，保障核酸模板的完整性和下游实验的可靠性。

三、活性稳定，反应条件宽泛

DNase I的最佳工作pH范围为7-8。在Mg²⁺存在条件下，DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点；在Mn²⁺存在条件下，可在同一位点剪切DNA双链，形成平末端或粘末端。活性定义明确：1个活力单位（U）指在37℃条件下，10分钟完全降解1μg pBR322 DNA所需的酶量。产品提供1 U/μL及50 U/μL等多种浓度规格。

核心应用场景

一、RNA样品中基因组DNA污染去除（核心应用）

在RNA提取过程中，基因组DNA（gDNA）污染难以完全避免。DNase I是解决这一难题的 “黄金标准” 。本产品可在RNA提取期间、RNA提取后或反转录前高效消化gDNA。推荐反应体系为每10 µg RNA加入2 units DNase I，37℃孵育15-30分钟。即便RNA样本中仅存在微量的基因组DNA残留，也极有可能使qPCR的检测结果产生显著偏差，DNase I处理可有效避免这一问题。

二、DNase I足迹法（DNase I Footprinting）

DNase I足迹法是研究DNA-蛋白质相互作用的经典方法。其原理是：当蛋白质与DNA特定序列结合时，会保护该区域的DNA免受DNase I切割，在电泳图谱上形成一段空白区域（“足迹”）。该方法操作简便，广泛应用于转录因子结合位点的鉴定与表征。

三、染色质可及性分析（DNase-seq）

DNase I与高通量测序技术结合，形成了DNase-seq技术，可在全基因组范围内精准检测染色质的开放区域。DNase I超敏位点（DHSs）是染色质开放状态的标志，该技术可以全基因组范围鉴定调控元件、构建基因调控网络、识别转录因子结合位点。

四、体外转录与翻译系统的优化

在体外转录（IVT）反应中，模板DNA的残留会干扰后续实验。本产品可用于体外转录后模板DNA的消化，在转录反应完成后加入DNase I去除DNA模板，获得纯净的RNA产物，是mRNA疫苗和药物研发的关键步骤。耐盐型DNase I（DNase I-XT）特别适用于高盐缓冲体系中的DNA模板去除。

五、细胞凋亡检测（TUNEL）

DNase I参与细胞凋亡过程中的DNA片段化。在TUNEL（末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记）检测中，DNase I可用于部分剪切基因组DNA作为阳性对照。

六、DNA损伤与修复研究

DNase I对DNA的随机切割特性使其成为研究DNA损伤与修复机制的重要工具。通过分析DNase I切割模式的变化，可评估DNA损伤程度和修复效率。

七、基因编辑与克隆

在基因编辑和分子克隆实验中，DNase I可用于缺口平移（Nick Translation） ——在DNA聚合酶存在下，DNase I引入的缺口可作为DNA合成的起始点。

八、DNA标记与探针制备

DNase I处理可暴露DNA末端，便于后续标记反应，可用于产生DNA随机片段文库。

九、环境样本中DNA降解与病毒DNA检测

DNase I可用于环境样本中DNA的降解处理，以及在病毒DNA检测中去除背景DNA干扰，提高检测特异性。

产品参数

品质保障

• 经严格纯化工艺处理，不含RNase

• 不含其它DNA内切酶和外切酶

• 每批次产品经严格质检，活性稳定可靠

• 提供Reaction Buffer（10×）及EDTA失活溶液，配套齐全

• 仅限科研使用，严禁用于临床诊断或治疗

使用与储存建议

• 储存条件：建议-20℃保存。酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后立即放置于-20℃保存。

• 稀释方法：如需稀释，可用酶储存液（50mM Tris-acetate pH7.5，10mM CaCl₂，50%甘油）进行稀释。

• 避免反复冻融：建议首次使用时根据实验需求分装，避免频繁温度变化影响长期稳定性。

• 配套缓冲液：必须使用配套的10×DNase I Buffer，其含有Ca²⁺等必需组分。

• 避免交叉污染：操作时应使用专用的RNase-free耗材和试剂。

• 失活方法：加入EDTA至终浓度2.5mM后，65℃加热10分钟可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可使DNase I失活。

• 安全提示：为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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