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详细介绍
在分子生物学研究中,高纯度核酸的获取是基因表达分析、cDNA合成、体外转录及测序等下游实验成功的关键。然而,常规RNA提取方法获得的产物中常混杂DNA、蛋白质、多糖及游离核苷酸等杂质,严重影响后续定量与功能研究的准确性。8M氯化锂溶液(LiCl) 凭借其独特的化学特性,已成为科研人员眼中实现RNA选择性沉淀与蛋白质变性的理想工具。作为一种高浓度、即用型锂源,它能够强力破坏蛋白质与核酸的氢键结构,并可高效促进难溶物质的溶解。本产品采用高纯度原料配制,溶液澄清稳定,符合实验室试剂标准,低毒且操作便捷,为核酸纯化、蛋白变性及难溶物处理等科研场景提供可靠支持。
本产品为8M高浓度氯化锂水溶液,是高效、优质的锂源。作为高浓度储备液,用户可根据实验需求灵活稀释至工作浓度使用。
核心质量参数:
溶液经0.2μm滤膜过滤,采用高品质去离子水(18兆欧)配制,确保产品纯净无污染。
1. 破坏氢键,实现蛋白变性
8M氯化锂是一种高效的蛋白质变性剂。高浓度的锂离子(Li⁺)和氯离子(Cl⁻)能够有效破坏维持蛋白质二级、三级结构的非共价键——尤其是氢键。LiCl离子对能够定位水分子并破坏水网络结构,使蛋白质分子去折叠、结构松弛,从而实现蛋白质的完全变性。这一特性使其在蛋白提取、SDS-PAGE样品制备等实验中成为高效蛋白变性剂。
2. 选择性沉淀RNA
氯化锂在核酸纯化中最具价值的应用是RNA的选择性沉淀。在高浓度(如2.5M终浓度)下,Li⁺离子能够有效中和RNA分子上的负电荷,使其溶解度降低并从溶液中沉淀出来。关键优势在于:LiCl能高效沉淀RNA,但不沉淀DNA、蛋白质和碳水化合物。这一特性使其能从含有多种细胞组分的混合液中特异性分离出高纯度RNA,有效去除DNA、蛋白质、多糖及游离核苷酸等杂质。
1. RNA选择性沉淀与纯化
8M氯化锂溶液最经典的应用是总RNA分离后的RNA沉淀,以及从体外转录反应中回收RNA。其核心价值在于:
高效去除杂质:有效去除RNA样品中的糖类、蛋白质和DNA污染
标准操作流程:将RNA产物转移至离心管中,加入8M LiCl至终浓度2.5M,涡旋混匀后于-20℃放置30分钟沉淀RNA,然后13,000×g离心15分钟,用70–75%乙醇清洗RNA沉淀,干燥后用DEPC处理水或洗脱液溶解。
2. 蛋白质变性
高浓度LiCl能够有效破坏蛋白质的氢键,使蛋白质分子去折叠、变性。这一特性使其适用于蛋白提取、SDS-PAGE样品制备等需要蛋白质变性的实验场景。
3. RT-PCR与cDNA合成
本产品专为RT-PCR准备和cDNA合成而配制。作为一种便捷的即用型溶液,它有助于去除cDNA合成和翻译的抑制剂,在RNA沉淀后可直接用于下游反转录反应,确保cDNA合成的顺利进行。
4. 缓冲液制备与免疫沉淀
可用于LiCl缓冲液的制备以便进行免疫沉淀反应,也可用于制备洗涤缓冲液及放射免疫沉淀分析(RIPA)洗涤缓冲液。
5. 促进难溶物质溶解
氯化锂可作为聚酰胺和纤维素在酰胺溶剂中的增溶剂,促进难溶物质的溶解,提升纯度。
| 特点 | 说明 |
|---|---|
| 高浓度8M规格 | 高效锂源,按需稀释即可使用,无需自行配制 |
| 选择性沉淀RNA | 特异性沉淀RNA,不沉淀DNA、蛋白质和碳水化合物 |
| 无核酸酶/蛋白酶 | DNase、RNase、蛋白酶均未检出 |
| 0.2μm过滤 | 确保溶液纯净无颗粒物污染 |
| 高纯度 | ≥99%,金属离子杂质严格控制 |
| 溶液澄清稳定 | 室温密封保存不易变质,使用便捷 |
| 低毒易操作 | 符合实验室试剂标准,操作安全性高 |
储存条件:建议室温密封保存,置于干燥、阴凉处,避免阳光直射。氯化锂具有吸湿性(hygroscopic),应严格防潮。开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
使用注意事项:
无菌操作:注意无菌操作,避免微生物污染
个人防护:本产品对人体有刺激性,操作时请穿实验服并戴一次性手套,避免直接接触皮肤或吸入体内
稀释使用:根据实验需要稀释至工作浓度(如RNA沉淀时终浓度2.5M)
仅限科研使用:本产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗
8M氯化锂溶液广泛适用于以下实验场景:
8M氯化锂溶液以高浓度的锂源供给、精准的RNA选择性沉淀能力、高效的蛋白质变性功能,以及无核酸酶/蛋白酶的纯净品质,为分子生物学实验室的核酸纯化、蛋白处理及缓冲液配制等核心实验提供了可靠、便捷的基础保障。无论是RNA的精准沉淀与纯化,还是蛋白质的变性处理,本产品都能以稳定的性能和简便的操作,助力科研实验高效推进。
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