详细介绍
在分子生物学与基因工程研究中,琼脂糖凝胶电泳是分离、鉴定及纯化 DNA/RNA 片段最基础、最常用的技术手段。而电泳结果的清晰度与可靠性,在很大程度上取决于电泳缓冲液的品质。TAE 缓冲液(Tris-Acetate-EDTA Buffer) 正是为此而设计的经典核酸电泳专用缓冲液,由Tris 碱、乙酸及 EDTA 按优化配比精确配制而成。
本产品为 50 倍浓缩液(50×),甄选高纯原料精准配比,缓冲体系稳定、导电均匀,有效规避了自配试剂配比失衡、杂质偏高、电泳条带弥散等问题。溶液洁净无杂质,密封包装易于储存,即开即用,可满足核酸电泳、样本分离及日常教学实验使用,数据稳定可靠。
TAE 是生物学中使用最广泛的核酸电泳缓冲液,主要用于 DNA 的琼脂糖凝胶电泳。与 TBE 缓冲液相比,TAE 缓冲液对大于 13 kb 的大片段 DNA 具有更佳的分离效果,且 DNA 回收效率更高,尤其适用于后续需要进行胶回收和酶切鉴定的实验。
本产品严格遵循经典 TAE 配方体系。50× 浓缩液的主要成分为 2 M Tris-乙酸和 0.05 M EDTA。使用时,用蒸馏水或去离子水稀释 50 倍即可获得标准的 1× TAE 工作液,其组成为 40 mM Tris-乙酸、1–2 mM EDTA,pH 值稳定在 8.0–8.3(25℃)。
Tris-乙酸盐:Tris 提供稳定的弱碱性 pH 环境(约 8.0–8.5),乙酸提供抗衡离子,共同维持电泳体系的离子强度和 pH 稳定,确保核酸在电场中稳定迁移。
EDTA(乙二胺四乙酸):螯合 Mg²⁺、Ca²⁺ 等二价阳离子——这些阳离子是 DNase 和 RNase 的必需辅因子。EDTA 的存在可有效抑制核酸酶活性,防止 DNA/RNA 在电泳过程中降解。
与 TBE 缓冲液相比,TAE 在以下维度具有显著优势:
① 大片段 DNA 分离效果更佳
TAE 缓冲液对大于 13 kb 的大片段 DNA 具有更佳的分离效果。对于分辨率要求比较高时,较低浓度的胶有利于提高大分子量核酸的分辨率,此时宜使用 TAE。
② 超螺旋 DNA 分子量更准确
超螺旋 DNA 在 TAE 中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE 中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量)。
③ DNA 迁移率更快
双链线状 DNA 在 TAE 中的迁移率较其他缓冲液快约 10%。
④ DNA 回收效率高,适配下游实验
TAE 缓冲液不含硼酸,不会影响连接等后续酶反应。回收 DNA 片段时宜用 TAE 缓冲系统进行电泳。如果 DNA 样品用于克隆实验,此时更适合使用 TAE 缓冲液。
⑤ 经济高效
本产品广泛适用于以下核酸电泳相关实验场景:
| 应用领域 | 工作浓度 | 用途说明 |
|---|---|---|
| DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 1× | DNA 片段的分离、检测与回收 |
| DNA 片段胶回收 | 1× | 推荐使用 TAE 体系,回收效率高于 TBE |
| 大片段 DNA 电泳 | 1× | >13 kb 大片段 DNA 分离效果佳 |
| 非变性 RNA 琼脂糖凝胶电泳 | 1× | RNA 完整性检测 |
| 脉冲场凝胶电泳(PFGE) | 1× | 超大分子量 DNA 分离 |
| 凝胶制备缓冲液 | 1× | 与电泳缓冲液一致,适用于琼脂糖凝胶配制 |
1× 工作液配制:取适量 50× TAE 浓缩液,使用蒸馏水或去离子水按 1:50 比例稀释。例如:10 mL 50×TAE + 490 mL 蒸馏水 = 500 mL 1× 工作液,充分混匀即可使用。
注意事项:
TAE 电泳缓冲液(50×)以经典的科学配方、稳定的缓冲性能、快速的大片段迁移率与便捷的浓缩液形式,为核酸琼脂糖凝胶电泳提供了可靠、高效的分离体系。它让 DNA 与 RNA 的分离鉴定变得条带清晰、结果可靠、操作简便,是每一位分子生物学研究者值得信赖的基础试剂。
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