详细介绍
在分子生物学与基因工程研究中,核酸琼脂糖凝胶电泳是DNA与RNA片段分离、鉴定最基础、最常用的技术手段。而电泳结果的清晰度与可靠性,在很大程度上取决于电泳缓冲液的品质。5×TBE电泳缓冲液正是为此而设计的一款经典核酸电泳专用缓冲液。它由Tris(三羟甲基氨基甲烷)、硼酸(Boric Acid)及EDTA(乙二胺四乙酸) 按优化配比精确配制而成。
本产品为5倍浓缩液(5×) ,采用高纯试剂精准配制,使用时简单稀释即可获得高品质的工作液。其缓冲能力强、导电均匀,适用于DNA的琼脂糖凝胶电泳及聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)。浓缩型设计使得储存与使用更加灵活便捷,是分子生物学实验室核酸电泳的优质选择。
TBE缓冲液之所以能成为高分辨率核酸电泳的经典选择,源于其三种核心组分的协同作用:
Tris-硼酸盐(Tris-Borate):作为缓冲体系的核心,为溶液提供稳定的碱性pH环境,确保核酸分子在电场中保持恒定的电荷密度与迁移率。
EDTA(乙二胺四乙酸):作为金属离子螯合剂,EDTA可有效螯合体系中的二价金属离子(如Mg²⁺、Ca²⁺等),有效抑制核酸酶的活性,保护DNA/RNA样品在电泳过程中不被降解。
5倍浓缩设计(5×):以高浓度储备液形式提供,使用时按需稀释,既保证了储存的稳定性,也大幅降低了储存空间与配制频率。
工作液配制方法:取适量本品(5×TBE)用去离子水(或蒸馏水)稀释至0.5×使用即可。例如:10mL 5×TBE加入90mL去离子水混匀,即得到0.5×TBE工作液。此工作液含有45mM Tris-硼酸、1mM EDTA(pH 8.0)。一般情况下,DNA电泳常使用0.5×TBE工作液。
与传统的TAE缓冲液相比,TBE在以下维度具有显著优势:
① 缓冲能力强,适合长时间电泳
TBE的缓冲能力显著强于TAE。在长时间电泳(如过夜电泳)过程中,TBE能够持续维持凝胶体系的pH稳定,有效抵御因电解产生的pH漂移。这一特性使其特别适用于需要较长分离时间的实验场景,如大片段DNA的分离或需要充分展开的复杂样品分析。
② 分辨率高,小片段分离效果更优
TBE缓冲液尤其适合电泳小于1kb的核酸片段,分离效果好,条带清晰锐利。对于聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) ,TBE更是常用缓冲液。对于分辨率要求较高时,较高浓度的胶有利于提高小分子量核酸的分辨率,此时宜使用TBE。相比TAE,TBE能产生更清晰的条带,对紧密相邻的DNA条带具有更好的分辨率。
③ 可反复使用,经济高效
TBE缓冲液缓冲能力强,可反复使用多次,有效降低了单次实验的试剂成本,尤其适合电泳频率较高的教学与科研实验室。
④ 即用型浓缩液,操作便捷
本产品为5倍浓缩液形式,无需自行称量Tris碱、硼酸和EDTA,无需调节pH值。开瓶后按需稀释即可使用,有效避免了自行配制过程中因称量误差、pH调节不当引入的批次间差异。产品溶液清澈无沉淀,可直接用蒸馏水稀释后使用。
⑤ 适配多种电泳场景
TBE是常用的DNA或RNA电泳缓冲液,常用于PAGE胶,也可以用于琼脂糖凝胶。可用于DNA或RNA的非变性或变性凝胶电泳。部分产品经DNase/RNase free处理,可用于对核酸完整性要求较高的敏感实验。
TBE缓冲液中的硼酸成分会影响DNA回收效率以及后续的酶反应。因此,若要进行DNA片段的琼脂糖凝胶电泳回收实验,建议使用TAE缓冲液。
储存与沉淀处理:本产品可室温储存。如有沉淀析出时,属于正常物理现象,置于37℃水浴可使其溶解,不影响使用效果。
工作液浓度选择:对于分辨率要求不高时,使用TAE和TBE均可;对于分辨率要求比较高时,较高浓度的胶有利于提高小分子量核酸的分辨率,此时宜使用TBE。亦可以使用0.5~1×TBE工作液,该工作液缓冲能力相对较强。
本产品适配多种核酸电泳相关实验场景:
| 应用场景 | 推荐说明 |
|---|---|
| 小片段DNA/RNA分析(<1kb) | TBE分辨率高,条带清晰锐利 |
| 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) | TBE是PAGE的常用缓冲液 |
| 长时间电泳 | 缓冲能力强,适合过夜电泳 |
| 变性/非变性凝胶电泳 | 部分产品可用于RNA凝胶电泳 |
| RFLP分析 | 适配限制性片段长度多态性分析 |
| 课堂教学与实训 | 浓缩型设计,稀释即用,操作便捷 |
5×TBE电泳缓冲液以经典的Tris-硼酸-EDTA配方、卓越的缓冲能力、高分辨率的小片段分离效果以及便捷的浓缩液形式,为核酸琼脂糖凝胶电泳与聚丙烯酰胺凝胶电泳提供了可靠、高效的分离体系。它让DNA与RNA的分离鉴定更加条带清晰、结果可靠,是每一位分子生物学研究者值得信赖的基础试剂。
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