详细介绍
在生物化学与分子生物学实验中,蛋白质的变性、溶解以及核酸的结构分析,都离不开高效、可靠的试剂支持。8M尿素溶液作为一种经典的离液剂和高浓度蛋白质变性剂,通过破坏氢键等非共价作用力,能使蛋白质完全变性和溶解,是蛋白纯化、核酸研究及样品前处理等众多关键实验环节中不可或缺的核心试剂。富沃克生物推出的这款8M尿素溶液,甄选高纯尿素原料,以超纯水在洁净环境中精准配制,浓度准确(8mol/L)、溶液澄清透明。成品开瓶即用,无需繁琐配制,彻底解决了自配试剂溶解缓慢、浓度偏差、易分解沉淀等痛点。
尿素对蛋白质的变性作用基于多种分子层面的协同效应。研究表明,尿素并非通过间接破坏水结构来发挥作用,而是通过直接攻击蛋白质主链和侧链来诱导变性。具体机制包括两个方面:一是通过氢键直接与肽链的酰胺基团(NH和CO基团)结合,破坏蛋白质内部的氢键网络;二是通过置换非极性基团周围溶剂壳层中的水分子,削弱维持蛋白质构象的疏水相互作用。这两种作用的协同效应,使蛋白质从天然的有序构象转变为完全无规则的多肽链构象。本品能够有效破坏蛋白质二级、三级和四级结构中的氢键,也可以破坏DNA二级结构中的氢键。
在包涵体蛋白的溶解中,8M尿素能够有效溶解包涵体中的聚集蛋白,其溶解度为70%-90%。尿素通过破坏包涵体内蛋白分子间的氢键和疏水相互作用,使聚集的蛋白多肽链得以分散和溶解。与6M盐酸胍相比,尿素溶解包涵体的速度较慢、强度较弱,但具有不电离、呈中性、成本低等显著优势。
浓度精准,品质可靠
采用高纯尿素原料与超纯水在洁净环境中精准配制,浓度准确(8mol/L),溶液澄清透明、无杂质。每批次均经过严格质检,有效避免了自行配制时因称量误差、溶解不完全或水质问题导致的浓度偏差。8M尿素溶液的密度约为1.34 g/cm³(20℃) 。
即开即用,彻底告别繁琐配制
自行配制8M尿素溶液需精确称量480.5g尿素(分子量60.06),在约37℃条件下助溶,再定容至1L。尿素粉末在称量过程中易产生粉尘,且溶解过程中需注意温度不能超过37℃,否则尿素可能分解产生氰酸盐,对蛋白质氨基进行共价修饰。本产品以标准化生产替代人工配制,以即用型液体形式提供浓度精准、品质稳定的8M尿素溶液,让实验人员彻底告别繁琐耗时的配制过程。
稳定性强,批次一致性好
在推荐的储存条件下(室温保存,有效期12个月),产品可保持稳定的化学性能。需冷藏保存防止分解,开封后应尽快使用。本品仅限实验室研究与分析测试使用,操作时请穿实验服并佩戴一次性手套。
本产品广泛适用于蛋白质化学、分子生物学及相关领域的各类实验。
一、蛋白质变性电泳与样品制备
8M尿素溶液是蛋白质变性电泳(SDS-PAGE) 样品制备中的关键试剂,用于蛋白的解聚。在双向电泳(2-DE) 等蛋白质组学研究中,样品溶液中尿素的浓度通常要求不低于8M。
二、包涵体蛋白溶解与复性前处理
本品核心适用于原核表达重组蛋白包涵体溶解。在重组蛋白表达过程中,大肠杆菌等宿主细胞中常形成不溶性的包涵体。8M尿素能够有效溶解包涵体中的聚集蛋白,是包涵体蛋白复性前处理的关键步骤。溶解后的包涵体蛋白可选用多种色谱法进行纯化,通过透析去除尿素后即可进行蛋白复性。在变性条件下的His标签蛋白纯化中,8M尿素也常用于配制包涵体溶解缓冲液。
三、核酸变性研究
尿素同样能够破坏DNA和RNA二级结构中的氢键。在核酸研究中,8M尿素常用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(尿素-PAGE) ,使DNA双链完全打开,适用于核酸序列分析和结构研究。此外,高浓度尿素还能充分抑制细胞和整个组织的核糖核酸酶活性,保护RNA分子免受降解。
四、难溶蛋白的溶解与提取
本品可用于溶解一些不溶的或变性蛋白质,也可用于难溶性膜蛋白的提取。
操作规范:本产品为即用型试剂,开盖即可直接取用。取用时应使用洁净器具,避免污染。
有效期:在推荐的储存条件下(室温保存),有效期通常为12个月。开封后应尽快使用。
8M尿素溶液以精准的浓度标定、强劲的蛋白变性能力、高纯净的品质以及即开即用的便捷设计,为蛋白纯化、核酸研究及样品制备等实验提供了可靠、高效的试剂保障。选择本产品,即意味着从实验的起点获得稳定、可信的实验保障,让每一个实验数据都经得起验证与重复。
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