详细介绍
0.5M EDTA溶液(pH 8.0) 是分子生物学实验室中应用最为广泛的核心基础试剂之一。作为一种高效金属离子螯合剂,它能够强力结合镁离子(Mg²⁺)、钙离子(Ca²⁺)等二价金属离子,从而有效抑制依赖这些离子的核酸酶(DNase/RNase)和蛋白酶活性,为DNA/RNA的提取、纯化与保存提供可靠保护。本产品为预配制即用型高浓度储备液,pH已精确调节至8.0,确保了EDTA在高浓度下的完全溶解与长期稳定,省去繁琐的配制与pH调节步骤,是科研人员值得信赖的实验室常备试剂。
EDTA(乙二胺四乙酸,Ethylenediaminetetraacetic Acid)是一种六齿配体的强效螯合剂,其分子结构中含有四个羧基和两个氨基,能够与二价金属离子形成高度稳定的水溶性络合物。在分子生物学实验中,许多关键酶——包括DNase、RNase以及金属蛋白酶——的活性严格依赖于Mg²⁺、Ca²⁺等金属离子作为辅因子。EDTA通过螯合体系中的这些金属离子,使酶分子失去活性辅基,从而有效阻止核酸被降解,保护DNA/RNA的完整性。
预调pH 8.0,确保高溶解度:EDTA在pH低于8.0时极难溶解。本产品已用NaOH精确调节至pH 8.0,保证溶液完全澄清透明、无沉淀析出,即开即用,无需自行配制与调节。
高浓度储备液:0.5M的高浓度规格可作为储备液使用,实验时可根据需要稀释至工作浓度(通常为1-5 mM或0.5-1.5 mM),使用灵活高效。
无菌无酶处理:本产品经0.22 μm滤膜过滤除菌及DNase/RNase free处理,确保无核酸酶残留,可直接用于对洁净度要求较高的分子生物学实验。
1. 配制核酸电泳及储存缓冲液:是配制TAE、TBE等琼脂糖凝胶电泳缓冲液以及TE缓冲液(Tris-EDTA) 的必需成分。在TE缓冲液中,EDTA可有效螯合金属离子,保护储存于其中的DNA/RNA不被降解。
2. 核酸提取与纯化:在DNA/RNA提取过程中,EDTA通过抑制内源性核酸酶活性,保护目标核酸免受降解,显著提高核酸得率与完整性。
3. 终止酶促反应:在限制性内切酶酶切、核酸酶消化等反应完成后,加入EDTA可螯合反应体系中的金属离子辅因子,迅速终止金属依赖性酶促反应。
4. 细胞培养与消化:在细胞培养中,EDTA通过螯合钙离子破坏细胞间钙依赖性黏附,使贴壁细胞连接松散,常与胰酶配合用于贴壁细胞的消化传代。
5. 蛋白纯化与树脂再生:在His标签蛋白纯化中,EDTA可用于从固定化金属亲和层析(IMAC)树脂上剥离金属离子,实现螯合树脂的再生。
下游酶反应注意事项:由于EDTA会螯合Mg²⁺等金属离子,可能抑制DNA聚合酶、限制性内切酶等依赖金属离子的酶活性。在进行下游酶促反应前,务必确保通过洗涤或透析等方式去除多余的EDTA。
储存条件:本产品可在室温或4℃条件下密封保存,4℃保存效果更佳。在推荐的储存条件下,有效期为12-24个月。若长期储存后出现少量沉淀,可置于温水浴中摇匀溶解后继续使用。
0.5M EDTA溶液(pH 8.0)凭借其高效的金属螯合能力、预调pH的便捷性以及无菌无酶的卓越品质,已成为核酸研究、蛋白纯化及细胞培养等实验中不可或缺的基础试剂。选择本产品,即意味着从实验源头获得稳定可靠的品质保障,为每一次实验的精准与高效奠定坚实基础。
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