详细介绍
产品名称:5M乙酸钾溶液(实验级/高浓度储备液)——分子生物学核酸纯化的核心盐试剂
一、产品概述:核酸沉淀与蛋白纯化的高浓度盐试剂
乙酸钾(Potassium Acetate,KAc)是分子生物学实验室中一种极为重要的盐溶液,在质粒DNA提取和核酸纯化中扮演着不可或缺的角色。在经典的碱裂解法质粒提取实验中,5M乙酸钾溶液通常与冰乙酸配合使用,配制成pH 4.8的乙酸钾缓冲液。其中,K⁺能够与SDS结合生成不溶性的十二烷基硫酸钾(PDS),从而有效沉淀蛋白质-SDS复合物和大部分细胞壁碎片,使其在离心过程中与DNA分离。同时,乙酸根离子提供的酸性环境也有助于促进质粒DNA在乙醇沉淀步骤中的高效回收。
本产品为高浓度5M储备液,钾离子与乙酸根离子浓度精准,溶液澄清无杂质。用户可根据实验需要直接使用或按比例稀释,轻松适配质粒提取、核酸纯化等多元实验场景。
二、乙酸钾溶液的分子机制与教学科研价值
1. 在碱裂解法质粒提取中的核心作用
在碱裂解(SDS碱裂解法)质粒提取实验中,菌体首先在NaOH和SDS作用下被裂解,释放出细胞内容物,包括基因组DNA、质粒DNA和大量蛋白质。乙酸钾中和裂解液的高pH环境,同时提供高浓度的钾离子(K⁺),与SDS发生反应生成十二烷基硫酸钾(PDS)沉淀,将大部分蛋白质及基因组DNA共沉淀,经过高速离心后,质粒DNA保留在上清液中。这是实现质粒DNA与蛋白质等杂质高效分离的关键步骤。
2. 在DNA乙醇沉淀中的作用
在核酸乙醇或异丙醇沉淀步骤中,乙酸钾作为钾离子的供体,其提供的K⁺与质粒DNA的磷酸基团形成不溶性的钾盐,可有效提高DNA沉淀效率。因此,精准的乙酸根浓度与钾离子浓度是确保沉淀效果的重要保障。
三、产品核心特性
1. 高浓5M配方,离子强度精准可控
本产品为5 mol/L乙酸钾水溶液,精准释放K⁺与乙酸根离子,配方设计契合分子生物学核酸纯化与沉淀实验的需求,确保每次使用均可获得一致的离子强度。
2. 溶液澄清无杂质,低毒低刺激
产品经精密配制与过滤处理,成品呈现澄澈透明状态,无可见颗粒物与不溶物。乙酸钾为常规实验室试剂,低毒低刺激,使用安全,适合教学实训与科研实验场景。
3. 室温密封稳定保存,操作方便
本产品性质稳定,常规室温密封条件下存放不易变质。部分产品可室温保存12个月以上,若每次使用量较小,可适当分装后使用。
4. 即开即用或按需稀释,适配多类实验场景
成品以高浓度液体形式供应,可直接使用或根据需要稀释至工作浓度,适用于核酸提取中的杂质沉淀去除、蛋白纯化中的pH调控及试剂配制等多元场景。
四、典型应用场景
1. 质粒DNA的小量制备(核心应用)
在经典的SDS碱裂解法中,加入5M乙酸钾溶液(部分方案中为3M乙酸钾溶液配合不同配方)中和反应体系并沉淀蛋白质-SDS复合物,实现质粒DNA的初步纯化。
2. DNA/RNA的乙醇沉淀纯化
在核酸沉淀回收步骤中提供高浓度钾离子,提高沉淀效率,使核酸回收率更高。
3. 低渗培养基与缓冲液配制
4. pH精准调节
在蛋白质纯化与各类缓冲体系构建中,通过稀释使用或配合乙酸使用,实现对反应体系pH的精准调控。
五、使用方法与注意事项
使用方法(质粒提取参考流程):
使用前将溶液摇匀。
在碱裂解并加入中和液步骤后,按实验方案(如碱裂解液与乙酸钾溶液按一定比例混合)加入本产品。
颠倒或涡旋混匀后冰上静置数分钟,使蛋白质-SDS复合物充分沉淀。
高速离心后,上清液可直接用于后续DNA的乙醇沉淀或柱纯化步骤。
注意事项:
六、品质保障与订购信息
本产品严格执行分子生物学级试剂标准,每批次出厂附带质检报告(COA),涵盖浓度验证、pH值、澄清度等关键指标,满足院校教学质量审核与科研实验记录可追溯的要求。
产品名称:5M乙酸钾溶液(实验级/高浓度储备液)
包装规格:100mL/瓶、500mL/瓶(可根据教学与科研需求提供批量包装)
保质期:12个月(开封后建议尽快使用完毕)
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